首先将基因组DNA处理成单链状态，单链DNA在固相的表面经过桥式扩增，形成单分子簇，用作测序模板。
研究成果发表了我国ADY在酿造工业中的第一篇论文《酿酒行业生产模式的变革活性干酵母在酿酒工业中的应用》。从此在全国各地掀起了酿酒活性干酵母研究的高潮，研究成果在酿酒行业开始广泛应用，成为了各酒厂稳定质量、降低消耗、安全度夏、提高原料出酒率和经济效益的主要措施。
所以二米查酒感官普遍体现出清香欠协调，常伴有少量的辅料味，入口较冲辣，后稍带苦涩感，回味较长的特征。1.1.2试剂与仪器试剂：葡萄糖，氢氧化钠，氯化钠(二)麦康凯琼脂成分：蛋白胨17g，所胨3g，猪胆盐(或牛胆盐)5g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，乳糖10g，0.01％2吉晶紫水溶液10mL，0.5％中性红水溶液5mL。B群(福氏志贺氏菌)和C群(鲍氏志贺氏菌)：为甘露醇阳性，乳糖阴性。制法：加热溶解后分装试管，121℃高压灭菌15min，使成斜面。
声明：本文所用图片、文字版权归原作者所有。制法：将上述成分配好，加热使溶解，校正pH，分装每瓶225mL，115C：高压灭菌15min。1.3样品前处理固相萃取方法：分别用10 mL二氯甲烷、10 mL甲醇和10 mL超纯水活化活性炭/HLB萃取柱，保证小柱柱头浸润。
）1.4仪器条件1.4.1 质谱条件①APCI源：碰撞气为6，离子源温度350℃，气帘气35 psi，GS1为40 psi，NC为3 A，离子化电压5500 V，8种物质均使用APCI+。样品使用硫代硫酸钠进行脱氯保存。活性炭萃取柱萃取除NDPhA的8种物质，使用大气压电离源（APCI）测定。优化了流动相、离子源、萃取柱、样品保存条件、样品保存时间5个条件，实验结果表明：流动相使用0.1%的甲酸水和甲醇，仪器响应最好。
1.2 样品的采集和保存样品的采集：使用棕色玻璃瓶进行采样，1 L水添加保存剂0.1 gNa2S2O3。②ESI源：碰撞气为6，离子源温度550℃，气帘气35 psi，GS1为55 psi，GS2为50 psi，使用ESI+。
样品保存：避光、4℃冷藏保存，在7天内进行测定。N-亚硝基二甲胺-D6 100 mg/L、N-亚硝基二丙基胺-D14 100 mg/L、N-亚硝基二苯胺-D10 100 mg/L （First Standard）。洗脱液经氮吹（浓缩至近干注意剩余洗脱液500 L左右为宜），用超纯水定容至1.0 mL，混匀后经0.22 m滤膜过滤，置于进样瓶中，待上机测定。将NDMA，NDEA，NDPA，NPyr和NDphA 5种N-亚硝胺类化合物列为第三批监管污染物。
甲酸、乙酸铵（上海安谱实验科技公司）。标准物质及内标使用液：N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基甲基乙基胺、N-亚硝基吡咯烷、N-亚硝基二乙基胺、N-亚硝基吗啉、N-亚硝基二丙基胺、N-亚硝基二丁基胺、N-亚硝基二苯胺混和标液2000 mg/L（O2si）。用5 mL二氯甲烷以3 mL/min（约1滴/s）的流速洗脱小柱，洗脱液接收于收集管中，重复1次，合并洗脱液，再于收集管中加入500 L超纯水。1 实验部分1.1仪器和试剂液相色谱-串联四级杆液质联用仪：超高压液相色谱仪LC-30A（日本SHIMADZU公司），三重四级杆质谱仪API4000+(美国AB SCIEX公司，配备ESI源与APCI源)。
试剂：二氯甲烷、甲醇、乙腈（德国默克公司）由表l可以得出，XDA-5大孔树脂对茶多酚的吸附及解吸效果均较好，适于茶多酚的分离。
4、XDA-5树脂的动态吸附与解吸结果按照称取湿重为5g(精确到0.0001g)的XDA-5树脂，以10mL茶多酚提取液上柱，以1mL／min的流速过柱，收集流出液，定容至100mL容量瓶中，得吸附后待测液。吸附率=(M0-M1)／M0100％。
将抽滤后的树脂置于100mL烧杯中，加入70％乙醇50mL解吸，磁力搅拌器搅拌2h，抽滤，取1mL解吸液转移至25mL容量瓶中，加蒸馏水定容，得解吸后待测液。将烧杯放入数控超声清洗器中按照设定工艺条件提取(温度：40℃，时间：50min，功率：250W)。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：茶多酚，乙醇，没食子酸。测定每份流出液中的茶多酚含量，以样品编号为横坐标，以茶多酚的吸附率为纵坐标，绘制泄露曲线。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。前15mL上样量，茶多酚的吸附率在80％以上，第4份出现明显泄露，上样量过多会导致树脂吸附压力大，泄露点提前，造成树脂的吸附压力大。
上样量少，则无法完全发挥树脂的吸附能力，会导致树脂的浪费。洗脱剂对茶多酚的解吸效果用解吸率表示。
操作进行静态吸附-解吸实验，通过测定吸附后上清液以及解吸液中茶多酚的含量，以考察XDA-5树脂对茶多酚的静态吸附及解吸效果，并计算XDA-5树脂对茶多酚的静态吸附率和解吸率，结果见表1。解吸率=M2／(M0-M1)100％，式中M0表示茶样提取液中茶多酚质量／mg。
由图3可知，线性方程为A=0.01003C+0.0094l，R2为0.9989。分别收集吸附后的流出液，每份5mL，收集12份，分别编号1-12。
茶叶残渣用40℃，100mL蒸馏水超声提取5min，过滤，合并滤液，待容量瓶内溶液冷却后，加蒸馏水至刻度，震荡，摇匀，得茶多酚提取液的茶样提取液，保鲜膜密封，室温下静置24h，次日抽滤，滤液转移至100mL容量瓶中，加蒸馏水定容，得吸附后待测液。故确定样品液的最佳上样量为15mL(即茶叶药材与湿树脂用量的质量比约为1:7)。通过对比可知：没食子酸标准溶液与茶样提取液的最大波长都在752nm处。2、标准曲线绘制取已配制没食子酸标准溶液于752nm处测定吸光度，以溶液的吸光度Abs为纵坐标，以没食子酸标准溶液的浓度(ggmL-1)为横坐标，制作标准曲线(见图3)。
M2表示吸附后溶液中茶多酚的质量／mg，M2表示解吸液中茶多酚的质量／mg。提取后抽滤，滤液转移到500mL容量瓶中。
3、XDA-5树脂的静态吸附与解吸结果按照称取已处理过的XDA-5大孔树脂3g(精到0.0001g，湿重)，倒入50mL烧杯中，加入10mL按在分析天平上称取茶叶末25g(精确到0.001g)置于烧杯中，加入250mL40℃预热的蒸馏水，搅拌、摇匀。说明在0.00～58.00gmL-1范围内，标准浓度与吸光度符合比尔-朗伯定律，线性关系良好。
由图4可以看出，在茶样上样量逐渐增加的过程中，茶多酚的吸附率逐渐下降。树脂对茶多酚的吸附效果以吸附率表示。
所以确定该实验测定波长为752nm。由表2可以得出，在动态试验中XDA-5对茶多酚的吸附率和解吸率比静态稍差些，但仍在较快的流速下获得较好的茶多酚分离效果。将吸附茶多酚的树脂柱加30mL70％的乙醇进行解吸，以1mL／min的流速过柱，收集解吸液，定容至250mL容量瓶中，得解吸后待测液操作进行动态吸附-解吸实验，通过测定过柱液以及解吸液中茶多酚的含量，以考察XDA-5树脂对茶多酚的动态吸附及解吸效果，并计算XDA-5树脂对茶多酚的动态吸附率和解吸率，结果见表2。二、结果与讨论1、最大吸收波长的确定以蒸馏水为空白对照，用紫外-可见分光光度计对没食子酸标准溶液以及茶样提取液进行光谱扫描，扫描波长范围在600nm～800nm。
（5）探究最佳上样量为了考查XDA-5树脂对茶多酚的最佳吸附量，本实验以5.0g湿树脂填柱，以浓度3.6mgmL-1茶多酚提取液分批次上柱，吸附流速为0.5mLmin-1，每次5mL，共上样60mL，室温下进行动态吸附上样量少，则无法完全发挥树脂的吸附能力，会导致树脂的浪费。
测定每份流出液中的茶多酚含量，以样品编号为横坐标，以茶多酚的吸附率为纵坐标，绘制泄露曲线。树脂对茶多酚的吸附效果以吸附率表示。
吸附率=(M0-M1)／M0100％。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。
